药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍

2019-07-11

药敏试验(AST),目的是了解病原微生物对各种抗生素的敏感程度,以指导临床合理选用抗生素药物的微生物学试验。当猪场发生细菌性疾病时,在不知道病原菌对哪种抗菌药物敏感时,通过针对病原菌做药敏试验来选择药物是可靠有效的办法。

药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍
药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍

但有很多养殖朋友迷信药敏试验,认为只要通过药敏试验找到敏感药物,就能药到病除,实际上这也是对药敏试验的一种误解。药敏试验由于本身的局限性,其结果常常与临床不符, 有时临床有疗效但药敏报告是耐药, 可有时临床无效但药敏报告是敏感。

药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍
药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍

本文介绍了常用的两种药敏试验方法及其局限性,望广大朋友对药敏试验有正确的认识。

一、 药敏试验的方法

目前,被普遍应用的临床药敏试验方法和“抗药”或“敏感”的分界点判定标准是美国临床标准实验室(CLSI) 1971 年提出的。通常以琼脂或肉汤稀释法和纸片扩散法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC) ,并根据药敏分界点( breakpoint) 判定标准判断敏感与抗性。

药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍
药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍

纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散,随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少,从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同,抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小。

药敏试验方法 药敏试验常用方法及局限性介绍

如图中所示,按抑菌圈的大小排列,药物A>药物B>药物C,即接种菌对药物的敏感程度是药物A>药物B>药物C。

稀释法是在肉汤或琼脂中将抗菌药物进行一系列(对倍)稀释后,定量接种待检菌,35度孵育24h后观察。抑制待检菌肉眼可生长的最低药物浓度,即为该药物对待检菌的最低抑菌浓度。

如上图,A管中药物浓度最大,细菌菌落最少,G管中药物浓度最小,细菌菌落最多。

二、 药敏试验的局限性

1、 细菌群体组成的异质性对药敏试验的影响未能得到表达。例如,对于庆大霉素,以加速生长期菌群为参照,恒速生长期和衰亡期菌群药物敏感性增强。简单的说,如果试验用的细菌处于“青壮年期”,药物敏感性降低,如果细菌处于“老年期”,细菌对药物的敏感性增强。

2、 体内与体外环境不同,体外药敏试验不能反应病原菌和药物在体内的动态变化。不同的患者感染的病原菌不同、病原菌的数量不同、药物与血浆蛋白结合率不同、药物代谢产物是否具有与原药类似的抗菌活性等, 这些因素都会改变药物在体内的抗菌活性。

3、 未找到真正的感染菌或判断错误。现代猪场感染的特点是, 猪群普遍存在免疫抑制状态, 条件致病菌、非致病菌引起的感染增多, 在培养出细菌时都面临判断该细菌是致病菌或携带菌的问题。

4、药敏标准是以不同药物进入体内后血液中最高浓度与该药物体外最低抑菌浓度(MIC)间的关系所制定。标准是按血药浓度为基础制定,但不同组织中药物浓度有很多差异,药物浓度低的组织感染,药敏试验结构敏感的可能无效,某些感染组织药物浓度高,检测为耐药的药物也可能有治疗效果。

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